Leveforholdene i lejren var forfærdelige, som det var almindeligt i nazisternes dødslejre. Fangerne fik meget lidt mad, ikke nok tøj eller ly til at holde varmen, de havde ingen sundhedspleje og blev misbrugt af Ustaše-vagterne. Som i mange andre lejre blev forholdene også midlertidigt forbedret, når særlige grupper kom på besøg. For eksempel blev fangerne behandlet bedre, da medlemmer af pressen besøgte dem i februar 1942, og senere da en delegation fra Røde Kors besøgte dem i juni 1944, indtil de besøgende forlod lejren. Derefter blev leveforholdene igen som de plejede.
Fødevarer
Som i alle nazisternes dødslejre var den mad, som fangerne fik i Jasenovac, ikke nok til at holde dem i live. Den slags mad, de fik, ændrede sig med tiden. I lejren Brocice fik fangerne en "suppe" lavet af varmt vand med stivelse til morgenmad og bønner til frokost og aftensmad. (Disse "måltider" blev serveret kl. 6.00, 12.00 og 21.00.) Maden i lejr nr. III var i begyndelsen bedre, med kartofler i stedet for bønner. Men i januar begyndte fangerne kun at få en enkelt daglig portion tynd "ropsuppe". Ved årets udgang var kosten blevet ændret igen, til tre daglige portioner tynd grød lavet af vand og stivelse. Der blev foretaget flere ændringer, men fangerne fik aldrig nok mad til at undgå at sulte.
Vand
Vandet i Jasenovac var endnu værre end i de fleste dødslejre. Der var intet rent vand i lejren. Fangerne blev tvunget til at drikke vand fra Sava-floden, som var forurenet med hren (peberrod).
Shelter
I de første lejre, Brocice og Krapje, sov de indsatte i almindelige koncentrationslejrbarakker. Disse var lavet af træ og havde tre lag (niveauer) af køjer.
I lejr nr. III, som husede omkring 3.000 fanger, var der ikke nok husly til alle. I begyndelsen sov de indsatte på loftet i lejrens værksteder, i et åbent depot, der blev brugt som jernbane-"tunnel", eller simpelthen udenfor i det fri. Kort tid efter blev der bygget otte barakker. De indsatte sov i seks af disse barakker. De to andre blev brugt som "klinik" og "hospital". Det var ikke steder, hvor de indsatte kunne få medicinsk behandling og få det bedre. De var steder, hvor syge indsatte blev sat sammen for at dø eller blive dræbt.
Tvangsarbejde
Som i alle koncentrationslejre måtte fangerne i Jasenovac arbejde omkring 11 timer om dagen. De udførte hårdt tvangsarbejde og blev altid overvåget af Ustaše-vagterne. Disse vagter henrettede de indsatte selv af små årsager og sagde, at de indsatte "saboterede arbejdet".
Ustasas Hinko Dominik Picilli og Tihomir Kordić kontrollerede arbejdsafdelingen. Picilli piskede personligt de indsatte for at få dem til at arbejde hårdere. Han opdelte "Jasenovac-arbejdsstyrken" i 16 grupper, herunder grupper af bygningsarbejdere, murere, metalarbejdere og landbrugsarbejdere. Mange fanger døde af det hårde arbejde. Især murstensarbejdet var hårdt og farligt. Indsatte, der arbejdede som smede, blev tvunget til at fremstille knive og andre våben til Ustaše. At bygge diger var det mest frygtede arbejde af alle.
Sanitet
Inde i lejren var der ingen sanitære forhold. Fangerne havde ingen mulighed for at holde tingene rene og måtte leve under forfærdelige forhold. Blod, opkast og døde kroppe fyldte barakkerne. Barakkerne var også fulde af skadedyr som lus og rotter, som spredte sygdomme. Barakkerne lugtede forfærdeligt, fordi de indsatte måtte bruge en spand som toilet om aftenen. Spanden spildte ofte.
I pauser fra arbejdet (fra kl. 5.00-6.00, 12.00-13.00 og 17.00-20.00) fik de indsatte lov til at tømme deres tarme i offentlige latriner. Det var store gruber, der lå frit på åben mark og var dækket med træplanker. De indsatte faldt ofte i dem og døde. Ustaše tilskyndede til dette ved at lade fangerne adskille plankerne. Nogle gange druknede Ustaše endda fanger i hullerne. Når det regnede, løb disse gruber over og løb ud i søen. Det betød, at urin og afføring blandede sig i det vand, som fangerne måtte drikke.
De indsatte fik klude og tæpper, men de var meget tynde. Barakkerne var heller ikke nok til at holde de indsatte varme i kulden. Fangernes tøj og tæpper blev sjældent renset. De indsatte fik lov til at vaske dem hurtigt i søen en gang om måneden, undtagen om vinteren, hvor søen frøs til. Så fik de indsatte nogle gange lov til at koge et par stykker tøj, men ikke godt nok til at få det rent.
På grund af disse forfærdelige levevilkår led de indsatte af sygdomme, der førte til epidemier af tyfus, tyfus, malaria, lungeinfektioner, influenza, dysenteri og difteri.
Ejendele
Ustaše tog alt tøj og andre ting fra de indsatte. De fik kun fængselsuniformer, som var lavet af klude. Om vinteren fik de indsatte tynde "regnfrakker", og de fik lov til at lave lette sandaler. De indsatte fik en lille personlig madskål til de 0,4 liter "suppe", som de fik at spise. En indsat, hvis skål manglede (fordi en anden indsat havde stjålet den for at bruge den som toilet), fik ingen mad.
Under delegationsbesøgene fik de indsatte dobbelt så store skåle som normalt med skeer. Under disse besøg fik de indsatte også farvede mærker.
Angst
Fangerne var påvirket af en konstant frygt for døden og frygtelig stress over at være i en situation, hvor de levende og de døde er meget tæt på hinanden.
Når de først ankom til lejren, blev de indsatte chokeret over de forfærdelige forhold på turen til lejren og i selve lejren. Ustaše forstærkede dette chok ved at myrde en række af de indsatte, så snart de ankom til lejren, og ved midlertidigt at indkvartere de nyankomne i pakhuse, på loftsrum, i togtunnelen og udendørs.
Efter at de indsatte havde vænnet sig til livet i lejren, skulle de vænne sig til at leve med andre fangers strabadser, mishandling, tortur og dødsfald. Dødsfaren var størst under "offentlige forestillinger til offentlig afstraffelse", også kaldet selektioner. Fangerne blev stillet op i grupper, og enkeltpersoner blev tilfældigt udpeget til at blive dræbt, mens de stod over for resten. Ustaše gjorde det hele værre ved at lade processen tage lang tid. De gik rundt og stillede spørgsmål, kiggede på de indsatte, valgte en person, for derefter at skifte mening og vælge en anden.
De indsatte reagerede på to grundlæggende måder på at være i Jasenovac. Nogle blev aktivister. De dannede modstandsbevægelser (grupper, der forsøgte at bekæmpe Ustaše på forskellige måder, f.eks. ved at stjæle mad, planlægge flugt og oprør og forsøge at komme i kontakt med folk uden for lejren). Men de fleste af fangerne reagerede ved blot at forsøge at overleve og komme uskadt igennem dagen. Dette var ikke "at gå i kø til slagtning", men snarere en anden strategi for at forsøge at overleve.
Alle indsatte led af en eller anden form for psykiske problemer. Nogle kunne ikke holde op med at tænke på mad, andre blev paranoide, nogle havde vrangforestillinger, nogle mistede kontrollen over sig selv. Andre syntes at miste håbet. Nogle indsatte reagerede ved at forsøge at skrive om, hvad der skete med dem. For eksempel forsøgte Nikola Nikolić, Djuro Schwartz og Ilija Ivanović alle at huske og endda skrive om begivenheder, datoer og detaljer. Dette var meget farligt, da det var dødsstraf at skrive, og det var svært at spore datoer.
De fleste af henrettelserne af jøder i Jasenovac fandt sted før august 1942. Derefter begyndte ISC at deportere jødiske fanger til koncentrationslejren Auschwitz. Generelt blev jøder først sendt til Jasenovac fra alle dele af Kroatien efter at være blevet samlet i Zagreb og fra Bosnien-Hercegovina efter at være blevet samlet i Sarajevo. Nogle blev dog sendt direkte til Jasenovac fra andre byer og mindre byer.